目的基因的制备方法有哪些

目的基因的制备方法有哪些

目的基因是指编码蛋白质的结构基因,制备方法有基因合成和基因分离两种;基因分离是指从供体细胞的DNA中直接分离基因,比如“鸟枪法”;基因合成是以目的基因转录的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,再在酶的作用下合成双链DNA。

目的基因的检测和表达:

1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交(DNA-DNA)技术。

2、其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。

3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是采用抗原—抗体杂交技术。

4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。

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